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磁珠
AH2001人CD3/CD28激活磁珠
                    
產(chǎn)品型號:AH2001
更新時間:2025-05-13
廠商性質(zhì):代理商
訪問量:642
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一、產(chǎn)品簡介
英諾思(immuno-X)人CD3/CD28激活磁珠用于激活人T細胞,促進T細胞增值和T細胞分化。該產(chǎn)品利用三維立體磁珠模擬抗原呈遞細胞對T細胞的激活,ActBeads™ 提供的第一信號(CD3)和第二信號(CD28)使得T細胞高效擴增,避免T耗竭。
• ActBeads™ 激活磁珠濃度為4x107個/mL
• 磁珠粒徑均yi,流式細胞儀分析時可與T細胞明顯區(qū)分
二、試劑盒組分
產(chǎn)品名稱  | 存儲條件  | 緩沖液成分  | 功能  | 
ActBeads™ Human CD3/CD28 Activator  | 4°C保存,避免冷凍  | PBS, 0.1% BSA  | 通過磁珠偶聯(lián)的CD3/CD28抗體激活T細胞,促進T細胞增值和分化  | 
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
運輸條件: 4°C運輸
三、培養(yǎng)條件
·緩沖液:RPMI1640 培養(yǎng)基+10% FBS + 2 mM L-Glutamine+100 U/mL penicillin/streptomycin
·細胞因子:人IL2細胞因子
四、溫馨提示
·T細胞分離時,確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定,免疫細胞對滲透壓非常敏感
·IL7、IL15可與IL2聯(lián)合使用,促進T細胞增值
五、實驗步驟
1. 激活或者擴增T細胞
步驟  | 說明  | 
1  | 分離人T細胞,將其鋪到96孔平底培養(yǎng)板中,細胞密度為8 x 104/孔,培養(yǎng)基200 μL  | 
2  | ActBeads™ 人CD3/CD28激活磁珠震蕩混勻后,加入到細胞中,2 μL/孔 Note: 激活或擴增T細胞時,ActBeads TM和細胞比例為1:1;誘導Treg細胞分化時,磁珠和細胞的比例應增加到2:1  | 
3  | 加入IL2細胞因子,終濃度為100 U/mL  | 
4  | 進行T細胞培養(yǎng),5% 二氧化碳,37℃  | 
5  | 培養(yǎng)48小時后,T細胞體積變大,形態(tài)多樣  | 
6  | 當細胞密度較大時,更換新鮮培養(yǎng)基或者將細胞轉移至新的培養(yǎng)板  | 
2. T細胞重新刺激
通常T細胞在擴增到第7-10天時,需要通過添加新鮮的ActBeads™ 和IL-2進行多次重新刺激。經(jīng)過反復重新刺激后,CD8+ T細胞仍保持細胞毒性。
步驟  | 說明  | 
1  | 將T細胞重懸后置于無菌離心管中,在磁力架上吸附2分鐘  | 
2  | 倒出/吸出T細胞,進行細胞計數(shù)  | 
3  | 將T細胞重新鋪到培養(yǎng)板中,密度0.5–1 × 106 cells/mL  | 
4  | 培養(yǎng),5% 二氧化碳,37℃  | 
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